Uso previsto

Il test combinato Dengue NS1 Ag-IgG/IgM è un test immunocromatografico rapido per la rilevazione qualitativa degli anticorpi (IgG e IgM) e dell'antigene NS1 del virus dengue nel siero o nel plasma per facilitare la diagnosi dell'infezione virale dengue.

[RIEPILOGO]

La febbre dengue è una malattia infettiva acuta trasmessa da vettori causata dal virus dengue trasmesso dalle zanzare.L'infezione da virus dengue può portare a infezione recessiva, febbre dengue, febbre dengue emorragica, febbre dengue emorragica.Le manifestazioni cliniche tipiche della febbre dengue comprendono insorgenza improvvisa, febbre alta, mal di testa, forti dolori muscolari, ossei e articolari, eruzioni cutanee, tendenza al sanguinamento, ingrossamento dei linfonodi, diminuzione del numero dei globuli bianchi, trombocitopenia e così via in alcuni pazienti.Questa malattia è fondamentalmente popolare nelle aree tropicali e subtropicali, perché è trasmessa dalla zanzara Aides, il motivo per cui la popolarità è determinata stagionalmente, si verifica ogni anno comunemente da maggio a novembre, il picco è da luglio a settembre.Nella nuova area epidemica la popolazione è generalmente suscettibile, ma l'incidenza è prevalentemente adulta, nell'area endemica l'incidenza è prevalentemente infantile.

Principio

Il test combinato Dengue NS1 Ag-IgG/IgM è un test immunologico qualitativo basato su striscia di membrana per la rilevazione degli anticorpi del virus dengue (IgG e IgM) e dell'antigene NS1 del virus dengue nel siero o nel plasma.

Per il test IgG/IgM: il dispositivo del test è costituito da: 1) un tampone coniugato di colore bordeaux contenente antigeni ricombinanti dell'involucro della dengue coniugati con oro colloidale (coniugati della dengue), 2) una striscia di membrana di nitrocellulosa contenente due linee di test (linee T1 e T2) e una linea di controllo (linea C).La linea T1 è pre-rivestita con l'anticorpo per il rilevamento dell'anti-dengue IgM, la linea T2 è rivestita con l'anticorpo per il rilevamento dell'anti-dengue IgG.Quando un volume adeguato di campione viene dispensato nel pozzetto del campione della cassetta del test, il campione migra per azione capillare attraverso la cassetta.Le IgG anti-dengue, se presenti nel campione, si legheranno ai coniugati della dengue.L'immunocomplesso viene quindi catturato dal reagente pre-rivestito sulla banda T2, formando una linea T2 di colore bordeaux, che indica un risultato positivo del test IgG per la dengue e suggerisce un'infezione recente o ripetuta.L'anti-dengue IgM, se presente nel campione, si legherà ai coniugati della dengue.L'immunocomplesso viene quindi catturato dal reagente rivestito sulla linea T1, formando una linea T1 di colore bordeaux, che indica un risultato positivo al test IgM per la dengue e suggerisce una nuova infezione.L'assenza di linee T (T1 e T2) suggerisce un risultato negativo.

Per il test NS1: in questa procedura di test, l'anticorpo anti-Dengue NS1 viene immobilizzato nella zona della linea del test della cassetta.Dopo essere stato inserito nel pozzetto, un campione di sangue intero/siero/plasma reagisce con le particelle rivestite di anticorpo anti-Dengue NS1 che sono state applicate sul tampone del campione.Questa miscela migra cromatograficamente lungo la lunghezza della striscia reattiva e interagisce con l'anticorpo anti-Dengue NS1 immobilizzato.Se il campione contiene l'antigene NS1 del virus dengue, nella zona della linea del test apparirà una linea colorata che indica un risultato positivo.Se il campione non contiene l'antigene NS1 del virus della dengue, in questa regione non apparirà una linea colorata che indica un risultato negativo.

Per fungere da controllo procedurale, apparirà sempre una linea colorata nella zona della linea di controllo, indicando che è stato aggiunto il volume adeguato di campione e che si è verificata la permeabilità della membrana.

Conservazione e stabilità

Conservare come confezionato nella busta sigillata a temperatura ambiente o refrigerato (4-30 ℃ o 40-86 ℉).Il dispositivo del test è stabile fino alla data di scadenza stampata sulla busta sigillata.

Il test deve rimanere nella busta sigillata fino al momento dell'utilizzo.

Raccolta e preparazione dei campioni

1. Il test combinato Dengue NS1 Ag-IgG/IgM può essere eseguito su siero o plasma.

2. Per raccogliere campioni di sangue intero, siero o plasma seguendo le normali procedure cliniche di laboratorio.

3. I test devono essere eseguiti immediatamente dopo la raccolta del campione.Non lasciare i campioni a temperatura ambiente per periodi prolungati.Per la conservazione a lungo termine, i campioni devono essere mantenuti al di sotto di -20 ℃.

4. Portare i campioni a temperatura ambiente prima del test.I campioni congelati devono essere completamente scongelati e miscelati bene prima del test.I campioni non devono essere congelati e scongelati ripetutamente.

Procedura di prova

Lasciare che il test, il campione, il tampone e/o i controlli raggiungano la temperatura ambiente di 15-30°C (59-86°F) prima del test.

1. Portare la busta a temperatura ambiente prima di aprirla.Rimuovere il dispositivo del test dalla busta sigillata e utilizzarlo il prima possibile.Posizionare il dispositivo del test su una superficie pulita e piana.

2. Per il test IgG/IgM: tenere il contagocce verticalmente e trasferire 1 goccia di campione (circa 10μl) nel pozzetto del campione (S) del dispositivo di test, quindi aggiungere 2 gocce di tampone (circa 70μl) e avviare il timer.Vedere l'illustrazione di seguito.

3. Per il test NS1: tenere il contagocce verticalmente e trasferire 8~10 gocce di siero o plasma (circa 100μl) nel pozzetto del campione (S) del dispositivo di test, quindi avviare il timer.Vedere l'illustrazione di seguito.

4. Attendere la comparsa delle linee colorate.Leggere i risultati dopo 15 minuti.Non interpretare il risultato dopo 20 minuti.

Interpretazione dei risultati

Positivo:

Per il test IgG/IgM: sulla membrana appaiono la linea di controllo e almeno una linea del test.L'aspetto della linea del test T2 indica la presenza di anticorpi IgG specifici per la dengue.L'aspetto della linea del test T1 indica la presenza di anticorpi IgM specifici per la dengue.E se compaiono sia la linea T1 che quella T2, indica la presenza di anticorpi IgG e IgM specifici per la dengue.Quanto più bassa è la concentrazione di anticorpi, tanto più debole è la linea dei risultati.

Per il test NS1: vengono visualizzate due linee.Dovrebbe sempre apparire una linea nella zona della linea di controllo (C), e un'altra linea apparentemente colorata dovrebbe apparire nella zona della linea del test.

Negativo:

Nella zona di controllo (C) appare una linea colorata. Nella zona del test non appare alcuna linea colorata apparente.

Non valido: la linea di controllo non viene visualizzata.Un volume di campione insufficiente o tecniche procedurali errate sono le ragioni più probabili del fallimento della linea di controllo.Rivedere la procedura e ripetere il test con un nuovo dispositivo di test.Se il problema persiste, interrompere immediatamente l'utilizzo del kit di test e contattare il distributore locale.